浅看植物DNA提取试剂盒从植物培养细胞中提取基因组DNA

 
　　植物DNA提取试剂盒是根据氯化芐法构建的，能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。氯苄具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化，从而破坏细胞壁的特性。本制品利用了氯苄的这一特性，将植物样品冻结融解后，再使用PipetTip的尖将植物样品在Microtube壁上数次按压即可破坏细胞壁。本法与传统方法相比，省去了液氮研磨等烦琐步骤，有利于一次性处理大量样品。而且，本制品经过了改良，热处理时间只需15分钟，使用本制品从实验开始至水相回收只需30分钟时间。得到的基因组DNA可以进行PCR扩增及限制酶处理等。
　　植物DNA提取试剂盒从植物材料或植物培养细胞中提取基因组DNA
　　①按下表称取适量的新鲜植物材料(如选用的是冷冻干燥植物材料，则用量减半)，剪成小块放入研钵中，加入液氮，待样品冷冻*后快速、用力研磨至粉末状。研磨时应间断加入液氮以防止材料融化。
　　*如选取植物的根、种子等样品时，因其基因组DNA含量很低，需使用超过表格中所示的参数用量，此时请分两管进行步骤1~6的实验操作，在步骤7的操作中再将各管溶液分次加入至同一SpinColumn中过滤，使各管的基因组DNA结合到同一个SpinColumn上。
　　如从培养的植物细胞中提取基因组DNA，请离心收集2×103~1×107的培养植物细胞，加入150μl水充分悬浮细胞后移入研钵中，加入液氮后快速、用力研磨至粉末状。
　　注)样品研磨应充分，否则将会严重影响基因组DNA的收率。
　　②将研钵移至65℃水浴，当样品粉末刚开始融化时，向研钵中加入700μl的SolutionA和1.2μl的RNaseA1，用力碾磨30秒。
　　③收集650μl研磨好的组织匀浆移至CollectionTube中。如匀浆体积不足650μl，请补充SolutionA至650μl。65℃保温15分钟。
　　注)处理富含纤维的根/茎等植物材料或富含淀粉、蛋白质的种子等时，可延长水浴时间至60分钟。